靶向MAdCAM-1超声造影剂的制备及其体外寻靶实验研究

摘要

目的:制备适用于炎症性肠病超声诊断并靶向MAdCAM-1的长循环脂膜超声造影剂,并鉴定其物理性状及体外寻靶能力。方法:采用超声破碎法制备长循环脂膜超声微泡,通过"生物素-亲和素"法桥接超声微泡与抗MAdCAM-1单克隆抗体(MECA-367)。对制备出的靶向微泡造影剂进行物理性状检测;通过光镜和激光共聚焦显微镜观察该靶向造影剂对TNF-α诱导的炎症性肠病细胞模型的结合能力。同法制备携同型对照抗体IgG2a微泡作对照。结果:制备的靶向超声微泡形态好且粒径较均匀,平均粒径(464.5±85.7)nm,Zeta电位(-19.3±2.5)mV。SVEC4-10细胞MAdCAM-1的表达与TNF-α刺激时间成正相关。并且,当TNF-α浓度达到20 ng/ml时,MAdCAM-1的表达达到峰值。体外寻靶试验表明,该靶向造影剂较多并牢固地黏附到表达MAdCAM-1的细胞周围;携IgG2a的同型对照组未见明显结合。结论:成功制备出桥连MECA-367的靶向长循环脂膜超声造影剂,该造影剂在体外对高表达MAdCAM-1的炎性细胞模型有较强的特异性亲和力;TNF-α诱导SVEC4-10细胞建立炎症性肠病细胞模型的方法简便易行。