人脐带间充质干细胞体外分离、培养、扩增方法及生物学特性研究

摘要

目的建立从足月脐带分离间充质干细胞和体外传代培养技术，并对其生物学特性进行研究。方法采用双酶法分离脐带间充质干细胞，并通过传代进行纯化和扩增培养，绘制生长曲线；用流式细胞仪检测脐带表面抗原及细胞周期；采用软琼脂克隆实验以观察脐带致瘤性。结果成功建立了脐带间充质干细胞分离及培养扩增的方法；流式细胞仪检测结果显示，贴壁细胞均表达CD105、CD44、CD13和CD29，不表达造血细胞表型CD34、CD45和内皮细胞表型CD31，不表达CD106、CD166和HLA-DR；细胞倍增时间为30 h，细胞周期分析表明，G0-G1期和S＋G2＋M期所占比例分别为78.84%和11.16%，脐带间充质干细胞在软琼脂中无克隆形成。结论双酶法是一种较好的分离和培养方法间充质干细胞的方法，培养的细胞具有间充质干细胞的基本特性，无致瘤性，为建立间充质干细胞库和临床应用提供了理论依据。