细胞外三磷腺苷(eATP)测定方法的建立

摘要

目的 建立一种简单易行的可用于测定细胞外三磷腺苷的化学方法.方法 以葡萄糖为底物,己糖激酶为催化物,催化生成6-磷酸葡萄糖,后者和氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(辅酶Ⅱ作用生成还原型(辅酶Ⅱ),在340 nm处有吸光度的变化,并且与ATP的含量成正比.通过重复性试验、回收试验、干扰试验、线性范围测定来确定方法的可靠性.结果 重复性试验显示,eATP为45.5μmol/L时,CV为5.42%;eATP在5.2 μmol/L时,CV为7.56%;回收试验显示回收率为92.2%;线性分析为0～300 μmol/L,灵敏度为0.25μmol/L时干扰试验显示,三酰甘油、溶血对测定存在负干扰,维生素C、肌酐、尿酸有正干扰.结论 酶偶联法可作为eATP的常规测定方法进行自动分析测定.