MCL1激活MAPK-MEK信号通路促进食管癌细胞EC9706增殖

摘要

目的:探讨食管癌中MCL1表达变化及其调控食管癌细胞EC9706增殖的机制.方法:对2018年期间收集的12份食管癌组织及其癌周组织进行相对定量检测MCL1基因表达情况.构建表达MCL1的真核表达载体pCDNA3.1 H-MCL1-myc-His;将EC9706细胞设置转染空载体pCDNA3.1-myc-His的对照组、转染pCDNA3.1-MCL1-myc-His的实验组,细胞计数检测MCL1对细胞数量的影响,流式细胞仪检测细胞周期中各时期细胞比例变化,划痕实验检测对细胞迁移能力的影响.并以Western blot检测MCL1对MEK1磷酸化的影响,qRT-PCR检测MCL1对MAPK-MEK下游基因C-MYC、C-FOS、CCND1激活情况.结果:成功构建了表达MCL1的真核表达载体.和对照组相比,超表达MCL1后能够调控细胞周期改变,显著促进EC9706细胞数量增加,尤其在超表达MCL148h后,差异显著(P≤0.05);流式细胞仪检测细胞周期变化时也发现超表达MCL1后能够增加S+G2期的细胞比例;细胞划痕实验显示MCL1能够提高细胞迁移能力.检测到MCL1能够提高p-MEK1含量,并激活MAPK-MEK下游的靶基因C-MYC、C-FOS、CCND1的转录,差异显著(P≤0.05).结论:MCL1在食管癌中普遍高表达,并且能够通过激活MAPK-MEK信号通路促进食管癌细胞EC9706增殖,或许可以作为一个鉴别食管癌的候选基因.