不同成肌诱导液对人尿源干细胞体外成肌分化的探究

摘要

目的 研究人尿源干细胞(human urine-derived stem cells,hUSC)在不同成肌诱导液中的体外成肌分化能力及效果.方法 提取正常成人志愿者新鲜尿液,经体外培养、扩增、流式细胞术鉴定后,用4种不同配方的成肌诱导液分别诱导hUSC向骨骼肌细胞分化.在诱导第28天,光镜下观察细胞形态.并用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成肌分化特异基因结蛋白(desmin)和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)的表达量.结果 hUSC的细胞表面标物CD29、CD44、CD73和CD90为阳性,CD34、CD45为阴性,提示其为间充质来源.hUSC在A、B、C、D成肌诱导液中诱导培养28天后,细胞伸展变长,呈现肌细胞形态,可见肌管样细胞.4种成肌诱导液诱导14天及28天后成肌分化特异基因desmin和MyHC表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).组间比较提示,B和C成肌诱导液成肌分化下desmin和MyHC相对表达水平高于A、D成肌诱导液组.结论 4种成肌诱导液均可将hUSC定向分化成骨骼肌细胞.从细胞分化形态和成肌特异基因表达水平上分析,C成肌诱导液成肌分化效果更好.hUSC的这种向骨骼肌分化的能力,提示其在疾病治疗和病因学研究上具有潜在价值.