间充质干细胞传递线粒体对肺微血管内皮细胞的修复作用

摘要

目的间充质干细胞(MSCs)可以有效减轻肺损伤。文章研究MSCs传递线粒体对肺微血管内皮细胞修复作用,为ARDS的治疗提供新的思路。方法实验共分为4组:对照组(PMVEC+完全培养基)、脂多糖(LPS)组(PMVEC+LPS的完全培养基),MSC组(LPS干预的PMVECs+MSCs)及MSC-oli组(LPS预干预的PMVECs+MSC-oli)。将LPS诱导损伤后的PMVECs与MSC、MSC-oli在transwell小室中共培养,共聚焦显微镜下观察线粒体的传递,Westernblot检测线粒体相关蛋白(CYP1A1、CYP1A2)、内皮细胞的合成功能相关蛋白(eNOS、iNOS)及连接功能相关蛋白(VE-cadherin)的表达,葡聚糖法检测内皮细胞通透性,流式及JC-1膜电位检测细胞凋亡情况。结果将PMVEC与MSC、MSC-oli的线粒体分别染色后共培养,共聚焦显微镜下观察到MSC及MSC-oli的线粒体均向PMVECs转移,但MSC组较MSC-oli组转移了的线粒体更多。与对照组iNOS(0.13±0.03)、通透性指数(1)、JC-1(0.11±0.03)比较,LPS组(0.45±0.08、2.74±0.45、0.24±0.02)、MSC-oli组(0.43±0.04、2.34±0.56、0.23±0.03)均增加(P<0.05),LPS组eNOS、VE-cadherin表达明显高于对照组(P<0.05);LPS组iNOS、eNOS、通透性指数、凋亡率、JC-1均明显高于MSC组;MSC-oli组iNOS、通透性指数、凋亡率、JC-1明显高于MSC组(P<0.05),而eNOS明显低于MSC组(P<0.05)。结论MSCs可以通过传递线粒体减轻PMVECs的损伤。