胰高血糖素样肽-1受体激动剂减轻高糖诱导的巨噬细胞炎性反应的机制

摘要

目的探究胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)激动剂(exendin4)减轻高糖诱导的巨噬细胞炎性反应的机制。方法小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)分为3组分别做以下处理:对照组(RAW264.7细胞正常培养基培养)、高糖诱导组(RAW264.7细胞高葡萄糖培养基培养)、exendin-4组(RAW264.7细胞高葡萄糖培养基培养,添加exendin-4)。通过RT-qPCR检测不同处理组的GLP-1R mRNA水平,以及M1的促炎因子一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,iNOS),白介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和M2特异的基因IL-10,甘露糖受体1(mannose receptor 1,MRC-1),巨噬细胞半乳凝素1(macrophage galectin 1,MGL-1)、精氨酸酶(Arginase-1,ARG-1)的mRNA水平。通过免疫印迹(WB)检测VE-钙黏着蛋白和ZO-1,以及细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和血管细胞粘附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)的表达。通过蛋白质印迹分析p-STAT3和p-JNK蛋白表达。结果与对照组相比,高糖诱导组的GLP-1R mRNA水平降低(P<0.05),与高糖诱导组相比,exendin-4组的GLP-1R mRNA水平增加(P<0.05)。与对照组相比,高糖诱导组iNOS,IL-6和TNF-α的mRNA水平增加,IL-10、MRC-1、MGL-1和ARG-1的mRNA水平降低(P<0.05),与高糖诱导组相比,exendin-4组iNOS,IL-6和TNF-α的mRNA水平降低,IL-10、MRC-1、MGL-1和ARG-1的mRNA水平增加(P<0.05)。与对照组相比,高糖诱导组VE-钙黏着蛋白和ZO-1表达降低,ICAM-1和VCAM-1表达增加(P<0.05),与高糖诱导组相比,exendin-4组VE-钙黏着蛋白和ZO-1表达增加,ICAM-1和VCAM-1表达降低(P<0.05)。与对照组相比,高糖诱导组pSTAT3和p-JNK蛋白表达增加(P<0.05),与高糖诱导组相比,exendin-4组p-STAT3和p-JNK蛋白表达降低(P<0.05)。结论exendin-4抑制磷酸化STAT3和磷酸化JNK激活,促进M2极化和抑制M1极化,降低ICAM-1和VCAM-1表达,减轻高糖诱导的巨噬细胞炎性反应。