胞内游离钙浓度测定平台的建立

摘要

目的:建立一种简单有效的细胞内游离钙浓度测定平台。方法:用Fura-2作为荧光指示剂标记细胞内Ca2+,在倒置荧光显微镜下交替检测340nm和380nm激发的荧光强度,计算F340/F380代表的Ca2+相对浓度,再校正为标准浓度。结果:给予细胞刺激(如10mM咖啡因),F340/F380迅速增高,表明细胞内游离钙浓度迅速升高。对于快速变化的胞内Ca2+信号,系统反应灵敏、迅速,能很好地捕捉相关钙浓度变化。结论:由此建立起了一种简单有效的细胞内游离钙浓度测定平台,并应用于实际工作。这一平台在平滑肌细胞及心肌细胞游离钙浓度测定中都得到了充分的应用,平台建设中的第一手资料具有重要参考价值。