不同时间点雾化吸入STAT1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

摘要

目的:探讨雾化吸入信号转导子与转录活化子1(STAT1)反义寡核苷酸(ASON)干预肺纤维化大鼠的最佳时机。方法:清洁级健康雌性Wistar大鼠25只,随机分为生理盐水(NS)组、博来霉素(BLM)组和ASON 0 d组、ASON 7 d组、ASON14d组各5只。BLM组、ASON 0 d组、ASON 7 d组和ASON 14 d组大鼠气管内灌注BLM,NS组大鼠气管内灌注NS。大鼠气管内灌注BLM或NS后第0、2、4、6 d,NS组和BLM组大鼠雾化吸入NS,ASON 0 d组大鼠雾化吸入STAT1 ASON,ASON 7天组大鼠于气管内灌注BLM后第7、9、11、13d雾化吸入STAT1 ASON,ASON 14 d组于灌注BLM后第14、16、18、20d雾化吸入STAT1 ASON,各组均于气管内灌注BLM或NS后28d处死大鼠。左肺组织HE染色观察肺泡炎程度,Masson染色观察肺纤维化程度,免疫组织化学SP法测定肺组织中PAI-1、TGF-β1的表达。右肺测定肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达及羟脯氨酸含量。结果:①STAT1 ASON雾化吸入后,ASON 0 d组与BLM组、ASON 7 d组、ASON 14d组比较,肺泡炎和肺纤维化程度均明显减轻(P<0.05)。②ASON 0d组与BLM组比较,肺组织转移生长因子β1(TGF-β1)表达减少(P<0.05)。ASON 14d组与ASON 0d组比较,肺组织TGF-β1表达增多(P<0.05)。③与BLM组比较,ASON 0d组和ASON 7d组肺组织PAI-1表达降低(P<0.05);与ASON 0d组和ASON 7d组比较,ASON 14d组肺组织PAI-1表达增加(P<0.05)。④与BLM组比较,ASON 0d组肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平降低,ASON 7d组肺组织Ⅲ型胶原mRNA表达水平降低(P<0.05);与ASON 0d比较,A-SON 7d组和ASON 14d组肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平增高(P<0.05)。⑤与BLM组比较,ASON 0d组、ASON 7d组羟脯氨酸含量均减少(P<0.05);与ASON 0d组比较,ASON 7d组和ASON 14d组羟脯氨酸含量增高(P<0.05);与ASON 7d组比较,ASON 14d组羟脯氨酸含量增高(P<0.05)。结论:不同时间点雾化吸入STAT1 ASON对肺纤维化的干预作用是不同的,0d、7d可以减轻肺纤维化,其中0d雾化吸入是治疗的最佳时间。