反义hTERT对K562细胞端粒酶活性及细胞增生的影响

摘要

目的 :观察反义 h TERT表达质粒转染 K5 6 2细胞后是否能够抑制端粒酶活性及K5 6 2细胞的增生。方法 :质粒的构建与转染 :将 2 90 bp h TERT c DNA片段 ,反向连接于 p L NCX- neo质粒上得到反义 h TERT基因表达质粒。在体外转染中通过脂质体法将质粒导入 K5 6 2细胞中 ,以G4 18进行筛选得到阳性克隆 ;以 MTT法和形态学法检测反义 h TERT表达质粒对 K5 6 2细胞增生的抑制作用 ;以 TRAP- PCR EL ISA法来研究反义 h TERT基因对 K5 6 2细胞的端粒酶活性的抑制作用。结果 :转染反义 h TERT表达质粒组与对照组 （空白对照及空质粒组 ）相比较 ,生长速率明显变慢 ,部分细胞出现凋亡等形态学改变。反义 h TERT对 K5 6 2细胞的端粒酶活性具有明显的抑制作用。结论 :研究构建的端粒酶反义 h TERT基因表达质粒转染到 K5 6 2细胞中后 ,能够封闭 K5 6 2细胞h TERT- m RNA的表达 ,在抑制端粒酶活性的同时 ,减慢了 K5 6 2细胞的生长速度。