miR-429-5p调控Bcl2的表达参与脊髓损伤过程中神经元细胞凋亡的机制

摘要

目的 观察miR-429-5p在脊髓损伤后的表达变化及其对脊柱神经元细胞的凋亡的影响,并探讨miR-429-5p在脊髓损伤中的作用机制.方法 (1)培养大鼠背根神经节细胞,通过Qpcr检测miR-429-5p在大鼠背根神经节细胞受损后的表达变化,并通过流式细胞仪检测miR-429-5p对受损背根神经节细胞的凋亡的影响,同时通过Western blot检测Caspase3的蛋白表达;(2)通过TargetScan基因库预测miR-429-5p的靶基因为Bcl2,通过双荧光素酶实验验证其靶向关系,并通过Western blot检测miR-429-5p对Bcl2表达的调控;(3)利用SD大鼠建立脊髓损伤模型,正常组10只,脊髓损伤模型组20只,miR-429-5p Inhibitor组20只.进行BBB评分检测各组后肢运动的恢复情况,通过Qpcr检测miR-429-5p以及Bcl2的表达变化,通过Western blot检测凋亡相关基因Caspase3的变化,通过嗜银染色和HE染色观察神经纤维的再生.结果 (1)miR-429-5p参与脊髓损伤后的再生过程,miR-429-5p的表达下调(P<0.05);(2)miR-429-5p参与调控受损背根神经节细胞的凋亡,miR-429-5p的表达下调(P<0.05).结论 miR-429-5p通过靶向Bcl2参与调控脊髓损伤过程中神经元细胞的凋亡,从而影响脊髓神经细胞功能的再生,为继发性脊髓损伤的治疗提供了新的靶点.