核受体相关蛋白1基因慢病毒载体的构建

摘要

目的 构建使用绿色荧光蛋白(GFP)标记的核受体相关蛋白1(nuclear receptor related 1 protein,Nurr1)慢病毒表达载体(DCE-Nurr1)并鉴定.方法 使用引物设计软件Primier5设计基因Nurr1引物并采用聚合酶链反应(PCR)对其进行扩增,利用XbaI和NotI分别将基因Nurr1和载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP进行双酶切,利用T4链接酶将已酶切的基因Nurr1和已酶切的载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP连接起来,完成慢病毒表达载体的构建.结果 通过PCR成功地扩增了Nurr1基因并连接到载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP上,序列与GenBank登记的序列一致.结论 成功构建DCE-Nurr1慢病毒表达载体,为进一步在体内或体外研究Nurr1基因功能及其对多巴胺神经元的保护作用提供了基础.