弓形虫RH株和B36株致密颗粒蛋白1基因的克隆和序列分析

摘要

目的分析弓形虫2个不同分离株RH株和B36株致密颗粒蛋白1(GRA1)基因的异同.方法应用PCR技术,从弓形虫RH株、B36株分别扩增出致密颗粒蛋白1(GRA1)目的基因片段.将此目的基因片段插入PCR产物克隆专用载体pMD-18-T中,转化大肠埃希菌JM109,PCR鉴定其准确性并测序.DNAstar软件序列分析结果.结果获得弓形虫两个不同分离株RH株、B36株GRA1目的基因片段pMD-18-T/GRA1重组质粒.序列测定表明GRA1目的基因片断与GenBank报道的RH株GRA1基因(注册序列号:EU983103.1)有99%的同源性.经DNAstar5.0软件分析,发现两种虫株GRA1基因序列(R-RH株、B-B36株)有100%的相似性.结论GRA1基因在2个不同分离虫株之间无明显差异,具有较高的保守性.