长链非编码RNA ATB对肝癌细胞增殖、侵袭与转移能力的影响

摘要

目的探讨长链非编码RNA ATB对肝癌细胞株SMMC-7721增殖、侵袭与转移能力的影响及其相关机制。方法获取60例肝癌患者术中切除的肝癌及其对应的癌旁组织,采用实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法分别检测二者ATB的表达情况,分析其结果与肿瘤NM分期、癌细胞分化程度及淋巴结转移等临床病理学之间的联系;实验组为细胞转染技术构建的ATB高表达SMMC-7721细胞株,对照组为空载质粒pc-DNA3.1-NC。采用CCK-8法检测ATB对SMMC-7721细胞增殖能力的影响,应用Transwell法检测ATB对SMMC-7721细胞侵袭与迁移能力的影响,应用Western Blot法检测ATB过表达后Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin和c-myc蛋白的表达情况。结果ATB在肝癌组织中的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义[(1.903±0.217)vs(0.653±0.461)],t=7.129,P0.05)。qRT-PCR结果示转染过表达ATB可提高ATB在肝癌细胞SMMC-7721中的表达,与对照组存在统计差异[(72±9)vs(19±4)],t=9.826,P<0.01)。CCK-8结果显示ATB过表达的SMMC-7721细胞增殖能力能显著提高[24、36、72 h在490 nm处吸光度分别为(1.892±0.064)vs(1.026±0.012)、(2.562±0.039)vs(1.311±0.021)、(3.524±0.057)vs(1.912±0.079)],具有显著性差异(t值分别为3.187、6.729、9.024,均P<0.01)。Transwell侵袭实验组转入的底层膜的细胞数为(96±7)个,高于对照组(32±13)个,差异有统计学意义(t=7.016,P<0.01)。Transwell迁移实验中,实验组转入底层膜的细胞数为(101±10)个,高于对照组(40±8)个,差异有统计学意义(t=9.201,P<0.01)。蛋白质印迹法结果显示,与对照组相比,实验组中β-catenin和c-myc蛋白表达水平明显升高[(2.83±0.96)vs(1.03±0.32),(2.01±0.58)vs(1.35±0.22)],t值分别为16.22、10.39,均P<0.01)。结论ATB水平与肝癌细胞增殖、侵袭与转移相关,其机制可能通过Wnt/β-catenin信号通路实现。