蛋白激酶CK2抑制剂TBB对甲状腺鳞癌细胞株SW579CK2β和Akt表达的影响

摘要

目的:观察四溴苯三唑(TBB)对甲状腺鳞癌SW579细胞株CK2β和Akt表达的影响,探讨TBB抗甲状腺癌的作用机制.方法:体外培养SW579细胞,实验分为对照组(未加任何处理组和DMSO组)、TBB组(终浓度为25 μmol· L-1)和Wortmannin组(终浓度为100 nmol·L-1).MTT比色法测定细胞生长抑制率,同时测定蛋白激酶CK2的活性.采用RT-PCR方法检测SW579细胞CK2β及Akt的mRNA表达,分析各处理组CK2β及Akt基因表达变化.采用Western blotting方法检测SW579细胞CK2β及Akt的蛋白表达,分析各处理组CK2β及Akt的蛋白表达变化.结果:与对照组比较,TBB组SW579细胞生长抑制率明显增加(P＜0.01),细胞内CK2的活性明显降低(P＜0.01).RT-PCR结果表明,与对照组比较,TBB组CK2β的mRNA表达水平显著降低(P＜0.01),Akt的mRNA表达水平无明显变化(P＞0.05).Western blotting结果表明,与未处理组比较,Wortmannin组内源性CK2的活性无明显变化(P＞0.05),TBB组CK2β的表达明显降低(P＜0.01),同时Akt Thr308和Ser473磷酸化状态受到抑制(P＜0.01),总Akt水平无明显变化.结论:TBB可降低SW579细胞蛋白激酶CK2β的表达,进而再下调Akt的活性.