反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中6种活性成分的含量

摘要

目的建立反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸和白术内酯Ⅰ的含量。方法采用Diamonsil C18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.2 mol/L乙酸铵0.1%甲酸溶液(A)-乙腈(B);流速为1.0 m L/min;柱温为30℃;进样量为20μL。测定粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸时采用梯度洗脱(0~5 min,15%~20%B;5~10 min,20%~30%B;10~15 min,30%~35%B;15~20 min,35%~45%B,V/V),平衡时间为10 min,检测波长为254 nm;测定白术内酯Ⅰ时采用等度洗脱(0~8 min,80%-80%B,V/V),检测波长为220 nm。结果粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸分别在5~250 mg/L(R=0.999 9)、1~50 mg/L(R=0.999 9)、1~50 mg/L(R=0.999 6)、5~250 mg/L(R=0.999 6)、5~250 mg/L(R=0.999 9)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率(n=9)分别为99.3%、98.7%、97.5%、99.1%和99.2%。白术内酯Ⅰ在0.05~2.5 mg/L(R=0.999 6)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率(n=9)为97.6%。结论方法结果准确,操作简便,具有良好的重现性和稳定性,可用于防己黄芪汤的质量控制。