鼠防御素Crp4基因的克隆及序列分析

摘要

从昆明鼠回肠末端提取总RNA,经逆转录PCR(RT-PCR)扩增出鼠防御素Crp4基因片段.将回收的基因片段插入pMD-18T载体,小提质粒经限制性酶切鉴定后进行测序.结果表明:扩增出的基因片段长度为279bp.该基因编码93个氨基酸,其中成熟肽由34个氨基酸组成.通过序列分析发现1对引物克隆到2个不同的防御素基因(Crp4-1和Crp4-2)中,与2个鼠防御素基因(AY746426和AY746425)的同源性分别为97.8%和97.1%.在与家鼠、人、猕猴和兔的防御素成熟肽序列进行比较后,发现它们均含有6个保守的半胱氨酸.这一发现有助于对鼠防御素的结构和功能进行深入研究.