粉防己碱对人结直肠癌HCT116细胞株生物功能的影响及其机制

摘要

目的:探究粉防己碱对人结直肠癌HCT116细胞株生物功能的影响及其可能机制。方法:采用CCK-8检测粉防己碱对HCT116细胞活力的影响及其半数抑制浓度;用不同浓度粉防己碱(0、2.5、5和10μmol/L)处理细胞,细胞集落形成实验检测细胞增殖;流式细胞术、线粒体膜电位检测技术和Hoechst 33342细胞核染色技术检测细胞凋亡;细胞迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力;蛋白印迹技术检测细胞上皮间质转化标志蛋白表达水平及PI3K/AKT/NF-κB信号通路中关键分子活化程度。结果:HCT116细胞活力随粉防己碱处理浓度增加而降低,粉防己碱半数抑制浓度为9.441μmol/L;与0μmol/L组相比,2.5、5和10μmol/L粉防己碱组细胞形成集落数明显减少(P均<0.05);5、10μmol/L粉防己碱组G0/G1期细胞比例增加,S期和G2/M期细胞比例下降,凋亡细胞比例增加(P均<0.05);2.5、5、10μmol/L粉防己碱组细胞线粒体膜电位降低,细胞核荧光增强,迁移能力降低(P均<0.05);与0μmol/L组相比,10μmol/L粉防己碱组细胞多呈圆形,有更多上皮细胞形态;2.5、5和10μmol/L粉防己碱组细胞上皮标志蛋白E-钙黏蛋白表达增加,而间充质标志物N-钙黏蛋白和波形蛋白表达减少,且PI3K/AKT/NF-κB信号通路中关键分子AKT和NF-κB的磷酸化水平降低(P均<0.05)。结论:粉防己碱可能通过抑制PI3K/AKT/NF-κB信号途径逆转HCT116细胞上皮间质转化,进而降低细胞增殖迁移能力,诱导其凋亡。