OmpR对伤寒沙门菌巨噬细胞内生存能力的影响

摘要

目的:研究OmpR对伤寒沙门菌巨噬细胞内生存能力的影响及相关分子机制。方法:利用空载体对照株(WT-pBAD33)、ompR缺陷株(ΔompR-pBAD33)和ompR回补株(C-ΔompR)进行巨噬细胞THP-1胞内生存能力实验,探究伤寒沙门菌OmpR对于巨噬细胞内生存能力的影响。进一步用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、β-半乳糖苷酶活性、凝胶阻滞实验(EMSA)分析伤寒沙门菌OmpR对ssrA、ssrB和spiC的调控作用。结果:ΔompR-pBAD33巨噬细胞内生存能力显著低于WT-pBAD33,C-ΔompR部分恢复了其生存能力;qRT-PCR和β-半乳糖苷酶活性实验结果表明,ΔompR-pBAD33中巨噬细胞内生存相关基因ssrA、ssrB和spiC的转录水平较WT-pBAD33明显下降;体外表达纯化His-OmpR蛋白后进行的EMSA表明,OmpR可直接与ssrA、ssrB和spiC基因启动子区域结合。结论:OmpR通过直接调节巨噬细胞内生存相关基因ssrA、ssrB和spiC的表达,从而增强伤寒沙门菌巨噬细胞内生存能力。