一株鼠抗人PD-1单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

摘要

目的:制备鼠抗人PD-1单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法:以稳定表达人PD-1分子的基因转染细胞株L929/PD-1免疫BALB/c小鼠,采用流式细胞术筛选分泌鼠抗人PD-1单抗的杂交瘤细胞株。用Ig G亚型快速定性试纸法、肿瘤细胞株表面PD-1分子识别谱检测、抗体效价测定、竞争结合抑制实验和蛋白质印迹等方法对所获PD-1单抗的生物学特性进行分析鉴定。结果:获得1株持续稳定分泌PD-1单抗的杂交瘤细胞株,命名为6E1。单抗6E1的重链为Ig G1、轻链为κ。单抗6E1对肿瘤细胞株U937、Thp-1、Jurkat细胞表面PD-1分子的识别谱与商品化PD-1单抗MIH4一致。单抗6E1与商品化抗体MIH4具有相似的识别位点。蛋白质印迹检测结果表明单抗6E1可特异性识别PD-1分子。结论:成功获得了1株鼠抗人PD-1单克隆抗体。