柳树SSR反应体系的建立与优化

摘要

以簸箕柳(Salix suchowensis Cheng)295-2、绵毛柳(Salix erioclada)716为试材,利用正交设计直观分析法和单因子试验优化柳树SSR-PCR反应体系,通过研究,确定柳树10 μLSSR反应体系为:DNA模板20 ng左右;Taq聚合酶:0.5 U;Mg2+:2.5 mmol/L;dNTP:0.1 mmol/L;引物(R&F):0.3 μmol/L.PCR反应程序为:94 ℃ 2 min;94 ℃ 45 s,(Tm-5)℃ 15 s,72 ℃ 45 s,35循环;72 ℃延伸8 min;4 ℃保温.利用优化的反应体系和程序,对杂种109(簸箕柳295-2×绵毛柳716)的90个单株和柳树的其他几个种进行PCR 反应,验证了其可行性.