黑麦1R染色体的微切微克隆研究

摘要

显微分离出黑麦（ＳｅｃａｌｅｃｅｒｅａｌｅＬ．）１Ｒ染色体，用ＣｏｈｅｓｉｖｅａｄａｐｔｅｒｓｓｉｎｇｌｅｐｒｉｍｅｒＰＣＲ（ＣＡＳＰＰＣＲ）方法进行体外扩增，以ＤＩＧ１１ｄＵＴＰ标记扩增产物为探针，进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分子杂交，结果表明扩增产物来自黑麦１Ｒ染色体。用１／１０体积的连接物转化Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α，获得１００００多个重组菌落。经酶切分析，克隆子的插入片段为２５０～５００ｂｐ。