基于生物素化纳米抗体检测拟除虫菊酯代谢物3-苯氧基苯甲酸的研究

摘要

该研究在前期已制备获得的拟除虫菊酯代谢物3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)纳米抗体(Nb)基础上,将其进行生物素化,并利用多聚辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(polyHRP-SA)进行信号扩增,建立了基于生物素-亲和素系统高灵敏间接竞争ELISA检测3-PBA残留的分析方法.对抗原抗体工作浓度、缓冲液条件(pH值、离子浓度、吐温-20浓度)及polyHRP-SA浓度进行优化后,所建方法对3-PBA的半抑制浓度(IC50)为1.7 ng/mL,线性范围为0.37～7.4 ng/mL,检出限(LOD)为0.15 ng/mL.将该方法用于人尿样品(高温酸水解后固相萃取净化)和环境水样品(简单过滤)中3-PBA的检测,加标回收率分别为87.0％～127％和78.0％～113％,相对标准偏差(RSD)不大于10％.该方法具有灵敏度高、操作简便,适用于生物与环境样本中3-PBA的快速筛查.