绵羊乳腺特异表达人肝细胞再生增强因子载体的构建及表达

摘要

用PCR技术分别从人和绵羊基因组DNA中扩增人肝细胞再生增强因子(Humanaugmenterofliverregeneration,hALR)基因和绵羊β-乳球蛋白(sheepbeta-lactoglobulin,BLG)基因启动区序列,从pEGFP-C1质粒中扩增增强绿色荧光蛋白(EnhancedGreenfluorescenceprotein,EGFP)基因及其表达调控元件.由质粒p7zf(+)构建成ALR基因乳腺特异表达、EGFP基因非组织特异性表达载体.同时体外培养绵羊胎儿成纤维细胞(sheepfetalfibroblastcells,SFFCs),脂质体介导载体DNA转染SFFCs,激光共聚焦显微镜观察和PCR检测转基因细胞,结果表明,增强绿色荧光蛋白基因在SFFCs中表达,转基因细胞中可扩增出BLG、ALR、EGFP基因条带.