黄芪注射液对内皮细胞的增殖及表达E-Selectin和VCAM-1的影响

摘要

目的:了解黄芪注射液对内皮细胞增殖及分泌黏附分子VCAM-1和E-selectin的影响,探讨黄芪注射液对造血调控的机理。方法:（1）.建立人脐静脉内皮细胞体外培养模型,用免疫细胞化学方法及电子显微镜技术鉴定内皮细胞;（2）.将HUVEC与黄芪注射液不同剂量（0μg/mL、4μg/mL、40μg/mL、400μg/mL和4000μg/mL）一起培养,用MTT法检测内皮细胞增殖;以流式细胞分析术测定内皮细胞增殖周期;以TNF作为阳性对照,用ELISA法对黏附分子VCAM-1和E-selectin进行测定。结果:（1）成功的建立了人脐静脉内皮细胞的体外模型;用Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色结果为阳性、电镜检测到W-P小体,证实培养细胞为人脐静脉内皮细胞。（2）内皮细胞随着培养时间的延长,各组均显示出不同程度的促生长效应（Time:P＜0.05;Concentration:P＜0.05）。（3）细胞周期检测显示实验组内皮细胞周期各时相的细胞数占细胞总数的百分比与黄芪组比较有明显的不同（P＜0.05）。S期和G 2/M期细胞显著增多（P＜0.05）,而G 0/G 1期细胞相对比例减少（P＜0.05）。（4）体外培养的内皮细胞可自然分泌VCAM-1。各个浓度的黄芪注射液与TNF一样均具有促进内皮细胞分泌VCAM-1的作用,其中400μg/mL的黄芪注射液浓度是促进内皮细胞分泌VCAM-1的最佳浓度（P＜0.05）,而且黄芪注射液具有协同TNF的作用（P＜0.05）。（5）内皮细胞体外培养在没有任何刺激的情况下未检测到E-se-lectin.黄芪注射液刺激内皮细胞也未检测到E-selectin.内皮细胞在TNF刺激活化后表达E-selectin.黄芪注射液能促进TNF活化的内皮细胞分泌E-selectin（P＜0.05）。结论:本研究提示,黄芪的补气生血途径之一可能是通过直接刺激内皮细胞增殖和分泌造血生长因子和黏附分子,从而间接发挥造血调控作用的;黄芪可能促进造血干祖细胞的归巢,并为开发黄芪用于辅助治疗血液病及肿瘤放、化疗后骨髓重建提供了理论依据。