hTERT-逆转录病毒载体构建及其在脐血间质干细胞中的表达

摘要

目的:构建hTERT-逆转录病毒载体,向脐血间质干细胞(UCBMSCs)中导入hTERT基因,观察该基因的表达.方法:PCR法扩增出hTERT全部片断,定向克隆入pLNCX2载体.将病毒质粒导入包装细胞内,筛选阳性产毒细胞,测定病毒滴度.取病毒上清感染脐血MSCs,筛选转基因细胞,检测转染前后hTERT在mRNA水平的表达.结果:用BglⅡ和NotⅠ双酶切构建质粒,证明PLNCX2-hTERT构建成功,转基因细胞的hTERT基因在mRNA水平得到表达.结论:hTERT-逆转录病毒载体构建成功,在逆转录病毒介导下,外源性hTERT基因转入脐血MSCs后得到表达.