小麦ISSR分析初探

摘要

以小麦基因组DNA为模板,对ISSR反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立了一套小麦ISSR分析的最优化反应体系及反应程序.即25 μL反应体系中,含有2.0 mmol/L Mg2+、150 μmol/L dNTP、200 nmol/L引物、60 ng模板DNA、2.0 U Taq DNA聚合酶.反应程序为第1个循环基因组DNA经94℃预变性3 min;40个循环为94℃变性30 s,48℃退火60 s,72℃延伸90 s;最后1个循环完成后,在72℃下延伸7 min.