miR-130a通过调控PTEN对缺血性脑卒中神经功能的影响

摘要

目的探究miR-130a通过调控磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)对缺血性脑卒中大鼠神经功能恢复的机制。方法60只雄性SD大鼠随机分为对照组(假手术处理,n=20)、模型组(手术建立缺血性脑卒中模型,n=20)和模拟转染组(手术建立缺血性脑卒中模型后,将miR-130a模拟转染注射到大鼠的侧脑室,n=20),通过神经损伤严重程度评分量表(mNSS)评估手术后第1、10和25天时的神经缺陷程度;用RT-PCR分析用miR-130a和PTEN表达;荧光素酶法测定野生型-PTEN和突变型-PTEN表达的荧光素酶活性,酶联免疫吸附实验检测各组大鼠脑组织白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;TUNEL染色检测脑组织神经元凋亡水平,蛋白印迹法分析磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK3β)及磷酸化原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶(p-c-Raf)表达。结果miR-130a模型组大鼠的mNSS评分,miR-130a的表达减轻神经细胞的功能损伤;与对照组比较,模型组的miR-130a mRNA、p-AKT、p-GSK3β及p-c-Raf表达降低,TUNEL阳性细胞数量和PTEN mRNA表达升高(P<0.05);与模型组和对照组比较,模拟转染组miR-130a mRNAp-AKT、p-GSK3β及p-c-Raf表达升高,TUNEL阳性细胞数量和PTEN mRNA表达降低(P<0.05);与对照组比较,模型组IL-10含量降低、IL-6和TNF-α含量升高(P<0.05);与模型组比较,模拟转染组IL-10含量升高、IL-6和TNF-α含量降低(P<0.05);与模拟对照组比较,仅miR-130a模拟组抑制了野生型-PTEN的相对荧光素酶活性(P<0.05)。结论m iR-130a可能通过影响PI3K/AKT轴和PTEN减轻缺血性卒中引起的神经功能缺损。