钙蛋白酶2介导雌激素调控乳腺肿瘤细胞GREB1基因表达

摘要

目的：探讨钙蛋白酶2（CANP2）对17β-雌二醇（E2）刺激MCF-10A转化细胞增殖能力、GREB1基因表达的影响及其机制。方法：以乳腺癌MCF-10A转化细胞为研究模型,乳腺癌MCF-7细胞为阳性对照,采用E2（50 nmol/L）刺激2种细胞24 h后,平板克隆方法观察细胞的增殖能力;以0.1%的二甲亚砜（DMSO）刺激MCF-10A、MCF-7细胞作为阴性对照组,以CANP抑制剂Calpeptin（Calp）预处理2刺激的MCF-10A转化细胞1 h或shRNA-CANP2转染2刺激的MCF-10A转化细胞沉默基因表达,同时设立E2对照组和转染空载体E2对照组,采用qRT-PCR检测细胞中GREB1基因表达水平,平板克隆方法观察细胞的增殖能力。结果：与阴性对照比较,E2能上调MCF-10A转化细胞和MCF-7细胞中GREB1基因表达（P〈0.01,P〈0.05）;与E2对照组比较,Calpeptin能抑制E2上调MCF-10A转化细胞和MCF-7细胞的GREB1基因表达,并促进细胞的增殖（P〈0.01）;与转染空载体E2对照组相比,shRNA-CANP2基因沉默能使MCF-10A转化细胞和MCF-7细胞增殖能力减弱（P〈0.01）,并抑制E2刺激的MCF-10A转化细胞中GREB1表达的上调（P〈0.01,P〈0.05）。结论：可能通过CANP2 E2诱导恶性转化乳腺上皮细胞GREB1基因的表达和细胞生长。