底物浓度选择在酶Km值测定中的重要性

摘要

以胰蛋白酶对酪蛋白的Ｋｍ值测定为例，讨论了底物浓度选择在酶Ｋｍ值测定中的重要性。底物酪蛋白的浓度分为三组：高浓度（１～５ｍｇ／ｍｌ），低浓度（０．１～１ｍｇ／ｍｌ）和极低浓度（０．０２～０．０８ｍｇ／ｍｌ），高底物浓度（＞８Ｋｍ）的测定结果不能有效地区分多酶（作用于同一底物的多种酶）的存在，也不符合作图法要求的准确度，所得到的Ｋｍ值可能是不准确的或错误的。因此，测定Ｋｍ值时所用的底物浓度必须在０．２～５Ｋｍ范围内，必要时应包括更广泛的浓度范围（包括高底物浓度）。