基于网络药理学和分子生物学探讨温下方治疗肺癌的作用机制

摘要

[目的]应用网络药理学方法预测温下方(由人参、大黄、附子、当归组成)治疗肺癌疾病的作用靶点和信号通路,并通过细胞实验验证其预测的准确性.[方法]搜索TCMSP数据库获得温下方组成药物的有效活性成分,使用Cytoscape软件建立活性成分-作用靶点网络,使用String数据库和Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络,并通过DAVID数据库对靶点进行基因本体论(GO)注释及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析.制备不同浓度温下方含药血清作用A549细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法测定细胞增殖情况,采用定量聚合酶链反应(qPCR)技术测定苏氨酸激酶(AKT)的mRNA表达水平,验证预测结果的可靠性.[结果]温下方作用于肺癌的有效活性成分有32个,相关靶点112个,在靶点间的蛋白-蛋白相互作用网络中,分析出温下方中有39个重要靶点与治疗肺癌有关.验证实验可知,温下方含药血清能浓度依赖性抑制A549细胞的增殖,下调AKT mRNA水平.[结论]温下方治疗肺癌具有多成分-多靶点-多途径的作用特点,可为深入研究其机制指明方向.