二次消化抽提法检验白骨化尸体指甲1例

摘要

对于高度腐败或白骨化尸体,肋软骨、指甲、长骨、牙齿均可作为DNA检材,常用的是肋软骨和长骨。笔者在检验一例杀人埋尸的案子中,对掩埋一年多已完全白骨化尸体指甲,应用二次抽提法,获得了良好的DNA STR分型。1、案情2004年5月,我市破获1起杀人案,尸体被掩埋在土里一年多,已完全白骨化,肋软骨也已消失,我们提取了死者指甲及失踪者父亲廖某、母亲罗某血样作DNA亲子鉴定。2、物证检验肉眼观察,指甲已经发黑霉变,变薄,很脆易碎,2.1第一次检验,使用银染方法,未获得STR分型2.1.1 DNA模板制备取一片指甲,纯水冲洗后,用棉签反复擦拭指甲表面,用刀片刮掉指甲表面物质,再用刀片刮取较内侧部分。纯水浸泡,13000转/分离心3分钟,2次重复。再加入450ulTNE,50ulDTT、8ulPK,5ulDTT,消化8小时。将消化液4000转/分离心10分钟,上清用酚、氯仿抽提制备DNA模板。2.1.2扩增及检测用CTT、DDD、FFV试剂盒扩增,垂直聚丙烯酰胺电泳,银染检测,结果未获得指甲的STR分型。将指甲冰冻保存备检。2.2半年后第二次检验,使用二次消化抽提及荧光检测方法,获得良好STR分型。2.2.1 DNA模板...