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miR-200a-3p靶向转甲状腺素蛋白对妊娠期高血压疾病滋养细胞生物学行为的影响

     

摘要

目的:探讨微小RNA-200a-3p(miR-200a-3p)在妊娠期高血压疾病(HDCP)患者胎盘组织中的表达及对滋养细胞生物学行为的影响.方法:收集2017年1月至2019年5月于陕西省西安市第四医院妇产科住院分娩的50例HDCP孕妇(研究组)和50例健康孕妇(对照组)的胎盘组织,采用荧光定量PCR(qPCR)法检测胎盘组织中miR-200a-3p和转甲状腺素蛋白(TTR)mRNA的表达.通过脂质体技术转染miR-200a-3p模拟物(mimic)、抑制物(inhibitor)及阴性对照(NC)至人绒毛膜癌JEG-3细胞,分别采用CCK-8法、Transwell实验以及AnnexinV-FITC/PI实验检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡.采用生物信息学、双荧光素酶报告基因实验分析miR-200a-3p与TTR的靶向关系,Westren blotting法检测TTR蛋白表达.结果:miR-200a-3p在研究组胎盘组织中的表达显著高于对照组,而TTR mRNA水平显著低于对照组(均P<0.01).转染miR-200a-3p mimic过表达miR-200a-3p后,可明显促进JEG-3细胞的增殖、侵袭与迁移,并抑制细胞凋亡(P<0.01).转染miR-200a-3p inhibitor抑制miR-200a-3p表达后,可明显抑制JEG-3细胞的增殖、侵袭与迁移,并促进细胞凋亡(P<0.01).miR-200a-3p能够明显降低TTR-WT荧光素酶的活性(P<0.01).转染miR-200a-3p mimic可显著降低TTR蛋白表达水平,而转染miR-200a-3p inhibitor结果与此相反(P<0.01).结论:miR-200a-3p在HDCP患者胎盘组织中呈高表达,抑制JEG-3细胞中miR-200a-3p表达可抑制细胞的增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡,miR-200a-3p可能通过负调控TTR参与HDCP的病理机制.

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