miR-140在膝骨关节炎软骨炎症中的作用及机制研究

摘要

目的:探讨miR-140通过调控VEGF信号通路在膝骨关节炎(KOA)软骨炎症中的作用机制.方法:将30只新西兰兔随机分为健康对照组、假手术组和KOA模型组,每组10只.建模后检测实验兔关节液白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-∞、血管内皮生长因子(VEGF)及软骨组织miR-140表达水平,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组软骨组织形态.取KOA模型组兔膝盖软骨组织制备软骨细胞,并转染miR-140 mimics和miR-140 inhibitor转染,分别为miR-140促进转染组和miR-140抑制转染组,设立空白对照组和阴性对照组.qPCR检测转染细胞miR-140和VEGF mRNA表达水平,Western blot法检测转染细胞VEGF的表达水平.结果:KOA模型组IL-1β、TNF-α和VEGF表达水平高于假手术组和健康对照组,且假手术组高于健康对照组(P＜0.05).KOA模型组与健康对照组和假手术组相比,滑膜细胞层次不清晰、排列无序,表面明显肿胀.KOA模型组miR-140表达水平低于健康对照组和假手术组(P＜0.05).与空白组比较,miR-140促进转染组miR-140相对表达量升高(P＜0.05),miR-140抑制转染组miR-140相对表达量降低(P＜0.05),阴性对照组不变(P＞0.05).与空白组比较,miR-140促进转染组miR-140相对降低(P＜0.05),miR-140抑制转染组VEFG mRNA及其蛋白表达升高(P＜0.05),阴性对照组不变(P＞0.05).结论:miR-140可能通过调控VEGF信号通路参与KOA软骨炎症的发生过程.