恩诺沙星残留酶联免疫分析法的建立

摘要

不合理地使用喹诺酮类药物导致了市场上出现喹诺酮类抗生素残留严重的现象,危害消费者的健康,因此建立快速检测喹诺酮类药物的方法成为研究热点.选择恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星3种药物为研究对象,通过碳化二亚胺法制备免疫原和包被原,使用紫外分光光度法鉴定,通过免疫BALB/c小鼠初步筛选可用的免疫原,然后免疫新西兰大白兔制备特异性多克隆抗体,建立icELISA方法.人工抗原ENR-OVA稀释1:64000,在37℃恒温水浴条件下孵育12 h,一抗稀释1:16000,一抗与抗原竞争反应60 min,酶标抗体稀释1:5000时反应最佳.抗体对恩诺沙星的半数抑制浓度(IC50)为4.539μg·mL-1,线性范围(IC20～IC80)为0.595～34.632μg·mL-1,与诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星有明显的交叉反应.