尼罗罗非鱼干扰素调节因子4基因的克隆与表达

摘要

[目的]探究干扰素调节因子(IRF)在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫中的作用.[方法]从尼罗罗非鱼中鉴定IRF4同源物,命名为OnIRF4.使用生物信息学分析软件分析OnIRF4的氨基酸序列.对健康尼罗罗非鱼腹腔注射浓度为3×107 CFU/mL的无乳链球菌200μL,用实时荧光定量PCR法分析OnIRF4在健康鱼中的表达模式及其对细菌感染的生物学效应.[结果与结论]OnIRF4序列的开放阅读框为1350 bp,编码449个氨基酸.OnIRF4与其他物种的IRF4蛋白的同源性为52％ ～98％.推导的OnIRF4肽链具有干扰素因子典型的DNA结合结构域(DBD)、干扰素相联结构域(IAD).亚细胞定位结果表明,OnIRF4主要定位在细胞核.表达分析表明,OnIRF4在健康尼罗罗非鱼皮肤、头肾、鳃、脑、肠、肌肉、肝、胸腺和脾中均有分布.在无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)感染后,OnIRF4在肝脏、脾脏、头肾、脑中的表达显著上调(P<0.05),表明OnIRF4参与了尼罗罗非鱼对细菌感染的免疫反应.