甲状腺刺激性抗体对甲状腺细胞功能影响及其作用机制

摘要

目的　研究甲状腺刺激性抗体 (TSAb)对甲状腺细胞合成和分泌激素功能的影响以及通过的信号传导途径 ,初步探讨 Graves’病 (GD)发病的分子机制。　方法　应用原代培养人甲状腺细胞为研究对象 ,放射免疫法检测 TSAb刺激后培养介质 T3、T4 、甲状腺球蛋白 (TG)的生成 ,改良愈创木酚氧化法检测细胞的甲状腺过氧化物酶 (TPO)活性 ;同时应用信号传导抑制剂阻断各传导途径 ,观察蛋白激酶 (PKA)抑制剂、细胞内 Ca2 +鳌合剂 (BAPTA- AM)、酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂——木黄酮对 T3、T4 、TG生成及 TPO活性的影响。　结果　 TSAb阳性组呈浓度和时间依赖性刺激 T3、T4 、TG生成及 TPO活性增加 ,T3、T4 、TG分泌高峰分别为2 mg/ m L TSAb 作用 4 8h,2 mg/ m L TSAb 作用 4 8h,3mg/ m L TSAb作用 72 h;TPO活性的高峰为 4 mg/ m LTSAb作用 4 8h。同时加 PKA抑制剂阻断环磷酸腺苷 /蛋白激酶 A (c AMP/ PKA )途径后 ,T3生成降低 6 3.3% ,T4 降低6 7.9% ,TG降低 5 1 .5 % ,TPO活性减少 79.2 % ;加 BAP-TA - AM鳌合细胞内 Ca2 + 阻断 PIP2 / Ca2 + 途径 ,能部分抑制T3、T4 、TG的生成 ,但对 TPO活性无明显作用 (P >0 .0 5 ) ;TPK通道抑制剂木黄酮对 T3、T4 、TG、TPO活性均无明显影响 (P>0 .0 5 )。　结论　 (1 )