c-myc反义核苷酸对淋巴瘤细胞系CA46凋亡的作用

摘要

目的研究c-myc反义核苷酸对体外培养的淋巴瘤细胞系CA46基因表达及诱导凋亡的作用.方法 c-myc反义核苷酸(ASPO)为人工合成的针对c-myc基因的一段外源性基因片段,以无义的寡核苷酸作为对照,导入CA46细胞后观察其基因表达及诱导凋亡的作用.流式细胞仪检测c-myc基因产物表达,荧光染色观察CA46细胞的凋亡形态,流式细胞仪定量检测凋亡百分率,TUNEL检测加用VP16后的CA46原位凋亡.结果 c-myc反义核苷酸(ASPO)作用CA46细胞后,RT-PCR示c-myc mRNA表达降低.荧光染色ASPO组细胞胞体缩小,胞膜完整,核质浓缩,出现黄绿色不规则或局部致密荧光,凋亡细胞约占23.3%,而SPO组及空白组未见明显凋亡细胞,细胞呈均匀绿色荧光.流式细胞仪检测仅用VP16 10 mg/L 3 d,ASPO作用2 d后加VP16 10 mg/L 1 d及ASPO作用3 d均出现凋亡峰,凋亡率分别为16%,72%及52%,而SPO组及空白但均未见凋亡峰.流式细胞仪检测CA46细胞c-myc蛋白为95.3%,经ASPO作用后降为23.7%,同时SPO组c-myc表达率为90.6%,TUNEL检测ASPO组凋亡细胞为25.5%,加用VP16后的CA46凋亡率为36.7%.结论体外实验中CA46特异地被c-myc反义核酸抑制生长,细胞出现凋亡表现,c-myc mRNA癌基因表达降低.