应用特异单引物法标记DNA探针

摘要

作者应用探针DNA上的一个片段作为DNA引物;以环化探针DNA或重组质粒DNA为模板,在DMA聚合酶的作用下,通过变性、退火和延伸过程,使探针DNA得到标记.3次实验结果表明,用过种单引物标法标记的DNA探针的放射比活性可达250×10^(14)cpm/g DNA,而用缺刻翻译法标记的DNA探针的放射比活性只有0.42×10^(13)cpm/g DNA,比单引物法要低5倍,打点杂交结果表明,用单引物法标记的探针能特异性地检测出70fg的靶基因序列,其敏感性比用缺刻翻译法标记的DNA探针要高两个数量级.