抗人肿瘤坏死因子-α单链抗体基因的构建及序列测定

摘要

构建鼠抗人肿瘤坏死因子-α（hTNF-α）单链抗体基因．方法：从分泌hTNF-α单抗的小鼠杂交瘤细胞株E6中获得抗体可变区基因的基础上，采用限制性内切酶酶切拼接法，并按VH-Linker-VL的结构将轻、重链可变区基因拼接单链抗体（ScFv）基因，荧光标记测序引物分析其核苷酸序列．结果：构建成长747bp的单链抗体基因，其中连接肽基因长45bP，经序列测定和分析表明为拼接正确、完整的抗hTNF-α单链抗体基因．结论：所构建ScFv为功能性的抗hTNF-α单链抗体基因．