乙型肝炎病毒PreS基因的克隆表达及亲和层析纯化

摘要

目的获取乙型肝炎病毒前S区基因(HBVpreS),序列测定正确后进行融合表达,为今后研究其机制及应用创造条件. 方法利用乙型肝炎病毒基因组为模板体外扩增HBVPreS基因后进行基因克隆. 目的基因经测序正确后克隆入融合表达载体pRSET-C中,转化大肠杆菌JM109(DE3). 目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的HBV-PreS蛋白,在变性条件下对目的蛋白进行纯化. 结果成功地扩增到preS区全长基因,得到融合6个His的HBV-PreS蛋白纯度大于90% . 结论构建了乙型肝炎病毒前S区基因的重组表达载体,获得了稳定表达的工程菌. 为以后的深入研究奠定了基础.