β1整合素基因缺失对Gi蛋白分布的影响

摘要

目的了解跨膜蛋白β1整合素对信号分子G蛋白细胞内构型的影响,为进一步研究β1整合素在信号传导中的作用打下基础. 方法采用荧光双标记及重叠合显微镜分析技术,观察野生型胚胎干细胞系(D3细胞),β1整合素基因敲除胚胎干细胞(G201细胞), β1整合素基因敲除后再植入胚胎干细胞(G201N)及小鼠胚胎心肌细胞中多种G蛋白(Gαs, Gαi1-3,Gαo,Gαi/o/t/z)细胞内构型特点和差异. 结果 Gαs,Gαo,Gαi/o/t/z在上述几种细胞系中均呈弥漫性分布,未能发现明显差异,与此不同的是Gαi1-3在D3细胞源性心肌细胞内呈网状分布,在非心肌细胞内呈线条状分布,而在G201细胞中Gi上述特异性构型被打乱,呈近似于弥漫样分布,值得注意的是在β1整合素基因重新恢复的G201N细胞Gi构型又呈网样或线条样分布,与野生型胚胎干细胞中Gi的构型相一致. 结论β1整合素能够影响信号分子Gi蛋白的细胞内定位,推测β1整合素可通过改变Gi的分布而影响Gi介导的信号传导.