6-磷酸果糖和核糖对α-晶状体蛋白分子伴侣活性的作用

摘要

目的 :探讨糖基化对α 晶状体蛋白的修饰 .方法 :分离牛αL 和 βL 晶状体蛋白 .分别与 1 0 0mmol/L 6 磷酸果糖(F6P)和核糖孵育 0～ 2 5d,于 0 ,1 5和 2 5d监测 2 0 0～ 6 0 0nm波长范围的吸光度 (A)值 ,色氨酸和非色氨酸荧光值 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白质交联物 .测定αL 晶状体蛋白对加热诱导βL 晶状体蛋白凝聚的保护作为分子伴侣活性 .结果 :F6P和核糖对αL 晶状体蛋白的修饰 ,主要表现为时间依赖性的色氨酸荧光强度降低 ,非色氨酸荧光强度增强 ,交联物形成 ,分子伴侣活性降低 ,F6P较核糖的修饰作用显著 .孵育 4d ,F6P组伴侣活性下降约 2 4 % (P <0 .0 1 ) ,1 5d ,伴侣活性几乎殆尽 ,而核糖组伴侣活性下降约 6 0 % (P <0 .0 1 ) .结论 :糖基化可导致α 晶状体蛋白色氨酸残基内环境的构象改变 ,形成交联物 。