K562细胞分泌的exosome的免疫电镜研究

摘要

目的:通过免疫电镜方法观察K562细胞分泌的exosome,探讨其潜在的临床应用价值. 方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度离心等方法分离出K562细胞释放的exosome,经透射电镜观察其超微结构. 采用固相免疫电镜法(SPIEM)制备exosome的HSP70,ICAM-1及ABL免疫电镜标本. 结果:K562细胞分泌的exosome为直径50～100 nm的膜性微囊结构,圆形或椭圆形,腔内为低电子密度成分. 经抗HSP70,ICAM-1和ABL抗体-胶体金免疫电镜标记,囊外膜及腔内可见点状﹑颗粒状电子致密物沉积. 结论:离心超滤和蔗糖密度梯度离心法纯化小量exosome方法可行,K562细胞分泌的exosome表达HSP70,ICAM-1和ABL蛋白,具备免疫原性.