PspA免疫小鼠抗肺炎链球菌侵袭性感染研究

摘要

目的:获取原核表达的肺炎链球菌PspA重组蛋白并研究其作为疫苗的价值.方法:分离培养肺炎链球菌TIGR4,获取其染色体DNA,采用基因体外重组法将编码PspA抗原表位在内的部分序列克隆到原核表达载体PET-32(a)内,酶切及测序鉴定重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,将获得的重组蛋白用Western Blot鉴定,镍柱纯化并透析除盐.用重组蛋白免疫动物,观察PspA抗体对肺炎链球菌感染小鼠的保护作用.结果:DNA序列与Gen-Bank中的数据相符,所表达纯化的蛋白经Western Blot证实为PspA,其抗体在肺炎链球菌感染中对小鼠有保护作用.结论:重组PspA刺激产生的抗体能够有效抵抗肺炎链球菌TIGR4侵袭性感染,该重组蛋白可作为肺炎链球菌多肽联合疫苗的组成部分之一.