酿酒酵母SPS途径调控因子Stp1的泛素化过程

摘要

研究酿酒酵母SPS途径关键调控因子Stp1p泛素化调控机制.通过构建基于双分子荧光互补技术的泛素化检测载体、泛素化位点定点突变及突变体氨基酸利用这三个层面来研究Stp1p的泛素化过程.通过对Stp1p的潜在的4个泛素化位点突变结果表明,与Stp1p相比,各突变体的荧光强度均有一定程度的减弱,其中三重突变体Stp1K49,129,113R荧光强度明显弱化.表明潜在的泛素化位点突变后,Stp1p的泛素化过程受到阻遏.进一步的氨基酸利用实验表明,泛素化位点突变对于调控菌体氮源利用具有重要的作用.上述结果说明,泛素化位点突变可以调控Stp1p的泛素化过程,进而影响茵体氮源的利用.