转基因vp28蓝藻口服疫苗半数有效量测定及其对斑马鱼的安全评价

摘要

为了探究转基因蓝藻作为口服疫苗来防治白斑综合征病毒（WSSV）的效果,本研究将转基因vp28蓝藻口服疫苗投喂凡纳滨对虾幼苗,验证其剂量梯度抗WSSV的影响,并测定其半数有效剂量（ED50）。以该剂量为依据投喂斑马鱼,通过测定斑马鱼体内的酶学指标、观察组织切片及养殖水体中氮磷等的变化,来探究转基因vp28蓝藻口服疫苗对水生生物和水体环境造成的影响。研究结果显示,随着转基因蓝藻口服疫苗剂量的增加,凡纳滨对虾幼苗抗WSSV的能力随之增强,测得ED50为0.027 g。分别使用野生型和转基因型蓝藻配合饲料投喂斑马鱼15 d,投喂结束后其生长状态良好、游动正常;投喂前后身体颜色无明显差异,不同组间体长增长不显著。转基因组斑马鱼中过氧化氢酶活力稍低于空白组和野生型组,过氧化物酶活力随着投喂天数的增长而呈降低趋势;水质监测发现,总氮日均波动变化且变化幅度较小,总磷在投喂期间有所提升,15 d时恢复到初始投喂日的水平。投喂蓝藻的2组氨氮均要低于空白对照组,氨氮含量的提升对斑马鱼的抗氧化能力存在一定影响;组织切片发现,各组斑马鱼的肝脏、心脏组织细胞无明显差异。研究表明,转基因vp28蓝藻口服疫苗可有效增强凡纳滨对虾抗WSSV能力,且抗病能力随着口服疫苗剂量的升高而增强;投喂斑马鱼后,斑马鱼无明显的毒理效应,且对水质影响较小;转基因vp28蓝藻作为亚单位疫苗投放对水生生物的影响较小,可为后续产业规模应用提供基础。