NLRP1与小鼠异基因造血干细胞移植后肝功能损伤的关系研究

摘要

目的:研究NLRP1与小鼠异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后肝损伤的关系。方法:以C57BL/6小鼠和NLRP1^(-/-)小鼠为受鼠,BABL/c小鼠为供鼠,建立allo-HSCT模型。应用流式细胞术检测受鼠骨髓中供鼠骨髓细胞嵌合率;全自动生化分析仪检测小鼠血浆中肝功能指标ASL及ALT水平;Western blot检测肝组织中NLRP1、Caspase-1前体及其活性片段p20、Mature-IL-1β、Mature-IL-18及MPO的表达情况。结果:Allo-HSCT后第14天,受鼠骨髓中供鼠骨髓细胞嵌合率均大于96%,说明供鼠造血干细胞基本完全植入。检测外周血浆中ALT和AST,由第7天的(173.9±12.39)U/L和(283.7±28.00)U/L逐渐升高到第14天的(3902±1745)U/L和(5316±1924)U/L,并于第28天降低至(3153±564.4)U/L和(4350±957.7)U/L。Western blot显示,NLRP1表达于移植后逐渐升高并在第14天最高,也于第28天降低,与ALT及AST的变化基本同步。当敲除NLRP1基因后,ALT及AST水平于相应时间点均较未敲除组小鼠明显降低;检测NLRP1下游相关炎性蛋白Caspase-1前体及其活性片段p20、Mature-IL-1β、Mature-IL-18及MPO表达显示,NLRP1基因敲除后其表达水平均较未敲除组降低。结论:Allo-HSCT可造成小鼠肝功能受损伴NLRP1表达增高,敲除NLRP1可减轻肝功能损伤程度,提示NLRP1可能是引起Allo-HSCT后肝功能损伤的因素之一。