尿冰在梅花鹿种群研究中的价值

摘要

冬季的野外调查可以收集到动物排在雪地或地面上的尿冰.为评价尿冰在种群生态学研究中的价值,本研究从野外收集15份梅花鹿(Cervus Nippon)尿冰、从动物园收集2份已知性别的梅花鹿尿冰,以实验室保存的2份已知性别的梅花鹿肌肉样品为对照,采用凝胶回收试剂盒提取DNA,通过cyt b和12S rRNA两个线粒体基因片段和AMEL、SRY两个核基因片段的PCR扩增,评价了尿冰DNA的可用性.结果表明:从1 mL融化的尿冰中可提取出650 ng的DNA.线粒体DNA分别成功扩增了0.472～1.2 kb的片段,核基因成功扩增了225～425 bp的片段.利用AMEL、SRY、ZFX 3个基因片段进行性别鉴定时,已知性别样品的鉴定结果均完全正确.野外尿冰样品在AMEL基因片段(大小为282 bp/225 bp)的扩增成功率为88.2％,在MT1/DSRY1-H和ZFX1-L/ZFX1-H进行复合扩增时的成功率为94.1％.上述结果说明,尿冰DNA完全可以满足基于mtDNA和核DNA的遗传学分析,是有价值的DNA来源.