金黄色葡萄球菌sPP2C的克隆、表达及性质研究

摘要

从金黄色葡萄球菌基因文库中克隆了一条新的双特异性磷酸酶,命名为sPP2C(protein phosphatase 2C,Staphylococcus aureus).sPP2C基因具有741个碱基,编码的蛋白有247个氨基酸,具有一个蛋白磷酸酶2C的催化结构域.sPP2C的分子量为26.1kD,等电点为4.95.在E.Coli.Rossetta中表达蛋白sPP2C.高纯度的sPP2C用亲和层析的方法纯化得到.酶学研究结果表明:sPP2C对磷酸酶的通用底物硝基苯磷酸(p-nitrophenyl phosphate,pNPP)不起作用,而与pSer/Thr和pTyr的寡肽均有去磷酸化作用.这些实验结果说明sPP2C是一个新的双特异性磷酸酶.